IBD高免卵黄抗体的制备

来源:http://www.jemmvision.com 作者:疾病防治 人气:90 发布时间:2019-11-21
摘要:最近一直有咨询高免卵黄制备工艺的,一直懒的整理,正好一朋友发过来一个,就贴出来供大家参考。首先需要声明的是,高免卵黄属于生物制品类,需要严格的条件和质量管理,否则

  最近一直有咨询高免卵黄制备工艺的,一直懒的整理,正好一朋友发过来一个,就贴出来供大家参考。首先需要声明的是,高免卵黄属于生物制品类,需要严格的条件和质量管理,否则做不好会引起疾病的传播等负作用,因此本文章只做参考和了解其基本原理的请不要私自加工。否则后果自负。

  

  1、基本原理

  

  健康产蛋鸡,用IBDV活苗配合灭活苗大剂量强化免疫,蛋鸡体内产生大量抗体,垂直传递到鸡蛋的卵黄中。将卵黄中的抗体稀释后,测定效价,合格者用于临床治疗鸡的传染性法氏囊炎病。

  

  2、鸡的免疫

  

  1) 、基础免疫:用15个免疫剂量的IBD弱毒疫苗对产蛋鸡进行皮下注射,即为基础免疫。

  

  2)、加强免疫:在基础免疫10~15天,再用同样的剂量和方法用弱毒苗进行免疫接种,同时接种IBD油乳剂灭活苗,每只鸡0.5~1ml,或灭活水苗1~2ml,皮下注射。

  

  3)、超强化免疫:在加强免疫后10~15天,取免疫蛋测定卵黄中抗体效价。用IBD琼扩实验法,抗体效价达到1:256以上为合格。

  

  3、高免卵黄抗体的制备:

  

  1、要求:IBD高免卵黄抗体检测效价达到≥1:64时方可使用(即为合格)。在保证≥1:64的前提下制备的抗体越稀越好。

  

  2、高免蛋的消毒:先用清洁水洗去蛋壳表面的粪污,再用0.5%的新吉尔灭溶液浸泡消毒20min,然后晾干。无菌条件下打破蛋壳倒净蛋清,把蛋黄倒入消毒好的大烧杯内。

  

  3、蛋黄匀浆:将蛋黄置于消毒好的捣碎机内,加入一定比例的生理盐水(根据蛋黄中的抗体效价而定)进行匀浆。

  

  4、加防腐抑菌剂:匀浆后的卵黄加入0.01%硫柳汞或每毫升卵黄液加入青霉素、链霉素各1000单位进行防腐抑菌,摇匀后分装于消毒好的瓶中,冻结保存。

  

  4、高免蛋黄液的检测:

  

  安全检测:健康雏鸡,每只皮下注射卵黄液1ml,观察一周应健康存活

  

  无菌检验:取高免卵黄液分别接种于普通营养琼脂河厌氧肉汤培养基上于37℃培养24小时,应无细菌生长。

  

  5、临床防治:每只鸡肌肉注射1ml。

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